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HPLC法测定宁夏产四种柴胡中kaerophyllin的含量

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摘要 HPLC法测定宁夏产四种柴胡中木脂素类成分(kaerophyllin)的含量,用甲醇提取后进样。色谱条件:ODS-C18柱 (150mm×6mm),流动相为甲醇-水(70∶30),测定波长328nm。结果表明宁夏产小叶黑柴胡、短茎柴胡、空心柴胡、秦岭柴胡中均含有 kaerophyllin。

关键词:HPLC法;kaerophyllin;宁夏产柴胡

  我国有20余种柴胡属植物供药用,宁夏有10种〔1〕均含有柴胡皂苷a.d。小叶黑柴胡中有较高含量的木脂素类成分,是区别于北柴胡的显著特点〔2〕。为系统地考察柴胡的质量,笔者对宁夏产四种柴胡中Kaerophyllin进行了含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器 LC-6A高效液相色谱仪(日本)。

1.2 试药 Kaerophyllin(日本东邦大学药学部分离,经UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR鉴定);柴胡〔采集于宁夏固原县,宁夏药品检验所邢世瑞主任药师鉴定为:北柴胡(B.chinense DC),小叶黑柴胡(B.smithii wolff var.parvifolium Shan et Y.Li),短茎柴胡(B.pusillum Krylov),空心柴胡(B.longicaule var.franchelii Boiss),秦岭柴胡(B.longicaule var.giraldii wolff)〕。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱Shimpack CLC-ODS-C18(150mm×6mm),流动相:甲醇-水(70∶30),流速1ml/min,进样量15μl,检测波长328nm。

2.2 标准曲线 精密称取Kaerophyllin 5mg,用甲醇溶解定容于10ml量瓶中,制成标准溶液;精密吸取2,6,10,14,18μl注入高效液相色谱仪,以进样量对峰高回归得方程为 Y=0.065+0.346C(r=0.9961),线性范围为1~9μg。

2.3 回收率试验 精密称取北柴胡粉末0.5g,加入Kaerophyllin 1.0260mg,用甲醇25ml 40℃温浸20min后,超声提取30min,过滤;重复两次,挥去甲醇,再用甲醇4ml溶解后;过滤,置5ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤(0.45μm);取滤液进样15μl,计算回收率为97.1%,RSD=2.1%(n=5)。
2.4 样品含量测定 精密称取4种柴胡粉末各0.5g。用甲醇25ml 40℃温浸20min后,按上述条件进行样品制备和含量测定,结果见图1、表1。

3 小结

  宁夏产小叶黑柴胡、短茎柴胡、秦岭柴胡、空心柴胡均含有Kaerophyllin,且含量较高,北柴胡中只有痕量。该实验对综合评价柴胡的质量具有参考价值。

表1 各柴胡中Kaerophyllin的含量(n=5)

药  材 Kaerophyllin(%)
北柴胡 痕量
小叶黑柴胡 0.53
短茎柴胡 0.76
秦岭柴胡 0.39
空心柴胡 0.21

A-kaerophyllin B-小叶黑柴胡 C-短茎柴胡
D-空心柴胡 E-秦岭柴胡

参考文献

〔1〕 邢世瑞主编.宁夏中药资源.银川:宁夏人民出版社,1987:47
〔2〕 尚明远,袁本香,王英华,等.HPLC法测定宁夏产柴胡中柴胡皂苷a.d的含量.西北药学杂志,1998,13(4):153
〔3〕 王英华,尚明远,邢世瑞,等.小叶黑柴胡化学成分比较研究简报.宁夏医学杂志,1996,18(增刊):9


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